വേനൽക്കാല ശാസ്ത്ര ഗൈഡ്: 40°C താപതരംഗം തന്മാത്രാ പരീക്ഷണങ്ങളെ നേരിടുമ്പോൾ

ചൈനയുടെ പല ഭാഗങ്ങളിലും അടുത്തിടെ ഉയർന്ന താപനില തുടരുന്നു. ജൂലൈ 24 ന്, ഷാൻഡോങ് പ്രവിശ്യാ കാലാവസ്ഥാ നിരീക്ഷണാലയം ഒരു മഞ്ഞ ഉയർന്ന താപനില മുന്നറിയിപ്പ് പുറപ്പെടുവിച്ചു, ഉൾനാടൻ പ്രദേശങ്ങളിൽ അടുത്ത നാല് ദിവസത്തേക്ക് 35-37°C (111-133°F) "സൗന സമാനമായ" താപനിലയും 80% ഈർപ്പവും പ്രവചിച്ചു. ടർപാൻ, സിൻജിയാങ് തുടങ്ങിയ സ്ഥലങ്ങളിൽ താപനില 48°C (111-133°F) ലേക്ക് അടുക്കുന്നു. ഹുബെയിലെ വുഹാനും സിയോഗാനും ഓറഞ്ച് അലേർട്ടിന് കീഴിലാണ്, ചില പ്രദേശങ്ങളിൽ താപനില 37°C കവിയുന്നു. ഈ പൊള്ളുന്ന ചൂടിൽ, പൈപ്പറ്റുകളുടെ ഉപരിതലത്തിന് താഴെയുള്ള സൂക്ഷ്മ ലോകം അസാധാരണമായ അസ്വസ്ഥതകൾ അനുഭവിക്കുന്നു - ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളുടെ സ്ഥിരത, എൻസൈമുകളുടെ പ്രവർത്തനം, റിയാക്ടറുകളുടെ ഭൗതിക അവസ്ഥ എന്നിവയെല്ലാം താപതരംഗത്താൽ നിശബ്ദമായി വികലമാകുന്നു.

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ സമയത്തിനെതിരായ ഒരു മത്സരമായി മാറിയിരിക്കുന്നു. എയർ കണ്ടീഷണർ ഓണായിരിക്കുമ്പോൾ പോലും, പുറത്തെ താപനില 40°C കവിയുമ്പോൾ, ഓപ്പറേറ്റിംഗ് ടേബിളിന്റെ താപനില പലപ്പോഴും 28°C ന് മുകളിലായിരിക്കും. ഈ സമയത്ത്, തുറസ്സായ സ്ഥലത്ത് അവശേഷിക്കുന്ന RNA സാമ്പിളുകൾ വസന്തകാലത്തും ശരത്കാലത്തും ഉള്ളതിനേക്കാൾ ഇരട്ടിയിലധികം വേഗത്തിൽ നശിക്കുന്നു. കാന്തിക ബീഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലിൽ, ലായകത്തിന്റെ ത്വരിതപ്പെടുത്തിയ ബാഷ്പീകരണ പ്രക്രിയ കാരണം ബഫർ ലായനി പ്രാദേശികമായി പൂരിതമാകുന്നു, കൂടാതെ പരലുകൾ എളുപ്പത്തിൽ അവക്ഷിപ്തമാകുന്നു. ഈ പരലുകൾ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് പിടിച്ചെടുക്കലിന്റെ കാര്യക്ഷമതയിൽ വലിയ ഏറ്റക്കുറച്ചിലുകൾക്ക് കാരണമാകും. ജൈവ ലായകങ്ങളുടെ അസ്ഥിരത ഒരേസമയം വർദ്ധിക്കുന്നു. 30°C-ൽ, ക്ലോറോഫോം ബാഷ്പീകരണ പ്രക്രിയയുടെ അളവ് 25°C-നെ അപേക്ഷിച്ച് 40% വർദ്ധിക്കുന്നു. പ്രവർത്തന സമയത്ത്, ഫ്യൂം ഹുഡിലെ കാറ്റിന്റെ വേഗത 0.5m/s ആണെന്ന് ഉറപ്പാക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്, കൂടാതെ സംരക്ഷണ ഫലപ്രാപ്തി നിലനിർത്താൻ നൈട്രൈൽ കയ്യുറകൾ ഉപയോഗിക്കുക.

PCR പരീക്ഷണങ്ങൾ കൂടുതൽ സങ്കീർണ്ണമായ താപനില അസ്വസ്ഥതകളെ നേരിടുന്നു. Taq എൻസൈം, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ് തുടങ്ങിയ റിയാക്ടറുകൾ പെട്ടെന്നുള്ള താപനില വ്യതിയാനങ്ങളോട് വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്. -20°C ഫ്രീസറിൽ നിന്ന് നീക്കം ചെയ്തതിനുശേഷം ട്യൂബ് ഭിത്തികളിലെ ഘനീഭവിക്കൽ, പ്രതിപ്രവർത്തന സംവിധാനത്തിലേക്ക് പ്രവേശിച്ചാൽ 15% ത്തിലധികം എൻസൈം പ്രവർത്തന നഷ്ടത്തിന് കാരണമാകും. മുറിയിലെ താപനിലയിൽ (>30°C) വെറും 5 മിനിറ്റ് എക്സ്പോഷർ ചെയ്തതിന് ശേഷം dNTP പരിഹാരങ്ങൾക്കും കണ്ടെത്താവുന്ന ഡീഗ്രഡേഷൻ കാണിക്കാൻ കഴിയും. ഉയർന്ന താപനിലയും ഉപകരണ പ്രവർത്തനത്തെ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നു. ലബോറട്ടറി ആംബിയന്റ് താപനില >35°C ആയിരിക്കുകയും PCR ഉപകരണത്തിന്റെ താപ വിസർജ്ജന ക്ലിയറൻസ് അപര്യാപ്തമാകുകയും ചെയ്യുമ്പോൾ (ഭിത്തിയിൽ നിന്ന് <50 സെ.മീ), ആന്തരിക താപനില വ്യത്യാസം 0.8°C വരെ എത്താം. ഈ വ്യതിയാനം 96-കിണർ പ്ലേറ്റിന്റെ അരികിൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കാര്യക്ഷമത 40%-ൽ കൂടുതൽ കുറയാൻ കാരണമാകും. പൊടി ഫിൽട്ടറുകൾ പതിവായി വൃത്തിയാക്കണം (പൊടി അടിഞ്ഞുകൂടൽ താപ വിസർജ്ജന കാര്യക്ഷമത 50% കുറയ്ക്കുന്നു), നേരിട്ടുള്ള എയർ കണ്ടീഷനിംഗ് ഒഴിവാക്കണം. കൂടാതെ, രാത്രിയിൽ PCR പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തുമ്പോൾ, സാമ്പിളുകൾ സൂക്ഷിക്കുന്നതിന് PCR ഉപകരണം ഒരു "താത്കാലിക റഫ്രിജറേറ്റർ" ആയി ഉപയോഗിക്കുന്നത് ഒഴിവാക്കുക. 4°C-ൽ 2 മണിക്കൂറിൽ കൂടുതൽ സൂക്ഷിക്കുന്നത്, ചൂടാക്കിയ ലിഡ് അടച്ചതിനുശേഷം ഘനീഭവിക്കുന്നതിന് കാരണമാകും, ഇത് പ്രതിപ്രവർത്തന സംവിധാനത്തെ നേർപ്പിക്കുകയും ഉപകരണത്തിന്റെ ലോഹ മൊഡ്യൂളുകൾ തുരുമ്പെടുക്കാൻ സാധ്യതയുമുണ്ട്.

ഉയർന്ന താപനിലയെക്കുറിച്ചുള്ള സ്ഥിരമായ മുന്നറിയിപ്പുകൾ നേരിടുന്നതിനാൽ, തന്മാത്രാ ലബോറട്ടറികളും അലാറം മുഴക്കണം. വിലയേറിയ ആർ‌എൻ‌എ സാമ്പിളുകൾ -80°C ഫ്രീസറിന്റെ പിൻഭാഗത്ത് സൂക്ഷിക്കണം, ഉയർന്ന താപനില കാലയളവുകളിലേക്ക് പ്രവേശനം പരിമിതപ്പെടുത്തണം. -20°C ഫ്രീസറിന്റെ വാതിൽ ഒരു ദിവസം അഞ്ച് തവണയിൽ കൂടുതൽ തുറക്കുന്നത് താപനിലയിലെ ഏറ്റക്കുറച്ചിലുകൾ വർദ്ധിപ്പിക്കും. ഉയർന്ന താപം ഉൽ‌പാദിപ്പിക്കുന്ന ഉപകരണങ്ങൾക്ക് ഇരുവശത്തും പിൻവശത്തും കുറഞ്ഞത് 50 സെന്റീമീറ്റർ താപ വിസർജ്ജന സ്ഥലം ആവശ്യമാണ്. കൂടാതെ, പരീക്ഷണ സമയം പുനഃക്രമീകരിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു: ആർ‌എൻ‌എ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ, qPCR ലോഡിംഗ് പോലുള്ള താപനില-സെൻസിറ്റീവ് പ്രവർത്തനങ്ങൾക്ക് രാവിലെ 7:00-10:00; ഡാറ്റ വിശകലനം പോലുള്ള പരീക്ഷണാത്മകമല്ലാത്ത ജോലികൾക്ക് ഉച്ചയ്ക്ക് 1:00-4:00. ഉയർന്ന താപനിലയിലെ കൊടുമുടികൾ നിർണായക ഘട്ടങ്ങളിൽ ഇടപെടുന്നത് ഈ തന്ത്രത്തിന് ഫലപ്രദമായി തടയാൻ കഴിയും.

ഉഷ്ണതരംഗ കാലത്തെ തന്മാത്രാ പരീക്ഷണങ്ങൾ സാങ്കേതികതയുടെയും ക്ഷമയുടെയും ഒരു പരീക്ഷണമാണ്. വേനൽക്കാല സൂര്യനിൽ, നിങ്ങളുടെ പൈപ്പറ്റ് താഴെ വെച്ച്, കൂടുതൽ താപം പുറന്തള്ളാൻ ഉപകരണത്തെ അനുവദിക്കുന്നതിന് നിങ്ങളുടെ സാമ്പിളുകളിൽ ഒരു അധിക പെട്ടി ഐസ് ചേർക്കേണ്ട സമയമായിരിക്കാം. താപനിലയിലെ ഏറ്റക്കുറച്ചിലുകളോടുള്ള ഈ ആദരവ്, ചുട്ടുപൊള്ളുന്ന വേനൽക്കാല മാസങ്ങളിലെ ഏറ്റവും വിലയേറിയ ലബോറട്ടറി ഗുണമാണ് - എല്ലാത്തിനുമുപരി, വേനൽക്കാലത്തെ 40°C ചൂടിൽ, തന്മാത്രകൾക്ക് പോലും ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം സംരക്ഷിക്കപ്പെട്ട ഒരു "കൃത്രിമ ധ്രുവ മേഖല" ആവശ്യമാണ്.